Dengue vīrusa EDIII rajona eksponēšana uz fr... / ID: 327497

Autors: Kasandra (19)

Vērtējums:

Publicēts: 18.02.2013.

Valoda: Latviešu

Līmenis: Augstskolas

Literatūras saraksts: 13 vienības

Atsauces: Ir

Izvērst priekšskatu

SatursAizvērt

Nr.	Sadaļas nosaukums	Lpp.
1.	Kopsavilkums	3
2.	Ievads	4
3.	Literatūras apskats	5
3.1	fr bakteriofāgs	5
3.2	fr apvalka proteīna (CP) gēna ekspresijas plazmīda	6
3.3	Dengue vīrusa vispārīgs raksturojums	6
3.4	Dengue vīrusa E proteīns	8
4.	Materiāli un metodes	10
4.1	Materiāli	10
4.1.1	Darbā izmantotie E. coli celmi	10
4.1.2	Barotnes	10
4.1.3	Plazmīdas	11
4.1.4	Fermenti	11
4.1.5	Antivielas un konjugāts	11
4.1.6	Aparatūra:	11
4.1.7	Reaģenti	12
4.1.8.	Darbā izmantotie buferi un šķīdumi	12
4.2	Metodes	15
4.2.1	E.coli šūnu transformācija	15
4.2.2	E.coli šūnu kultivēšana DNS izdalīšanai	15
4.2.3	E.coli šūnu kultivēšana rekombinantā proteīna ekspresijas pārbaudei	15
4.2.4	Plazmīdu DNS izdalīšana pēc Birnboim & Doly metodes	17
4.2.5	DNS defosforilācija	18
4.2.6	DNS restrikcija	18
4.2.7	DNS ligēšana	19
4.2.8	DNS fragmenta ekstrakcija no agarozes gēla ar GFX Purifikation kit ( GE Healthcare)	19
4.2.9	DNS ekstrakcija ar DNA Extraction Kit #K0513 (Fermentas)	20
4.2.10	DNS Agarozes gēla elektroforēze	21
4.2.11	Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR)	22
4.2.12	DNS sekvenēšana	24
4.2.13	Vertikālā poliakrilamīda gēla (PAAG) elektroforēze	26
4.2.14	Western blotting (imunoblots)	27
4.2.15	Antigēna detektēšana un kvantitēšana ar imūdifūzijas metodi pēc Ohterloni	28
4.2.16	Mīkstā līze	29
5.	Rezultāti un diskusija	30
5.1	M455-21 konstrukcija	30
5.2	M452-20 konstrukcija	34
6.	Secinājumi.	37
7.	Pateicības	38
8.	Literatūras saraksts	39

Darba fragmentsAizvērt

Dengue vīruss, kas tiek pārnēsāts ar Aedes aegypti, kā arī ar Aedes albopictus sugu moskītiem, var izraisīt divas slimības cilvēkiem – Dengue drudzi un Dengue hemorāģisko drudzi. Dengue vīruss ir izplatīts Dienvid- un Dienvidaustrumu Āzijas valstīs, Okeānijā, Āfrikā, Karību jūras baseinā. Dengue vīrusam ir četri serotipi, kas apgrūtina ārstēšanu, jo saslimstot ar vienu serotipu, pēc pāris mēnešiem var saslimt ar citu. Pret Dengue vīrusu nav vakcīnas, tāpēc tiek veikti pētījumi tās izstrādei.
Šajā pētījumā tika izmantots Dengue vīrusa E proteīna III rajons (EDIII). EDIII satur primāros motīvus saistībai ar šūnu receptoriem, kā arī inducē protektīvas, neitralizējošas un kross-reaktīvas antivielas peļu imunizācijā.
Kā nesējs darbā tika izmantots fr bakteriofāga apvalka proteīns (CP), jo tas spēj savākties vīrusveidīgajās daļiņās.…

Autora komentārsAtvērt

Darbu komplekts:

IZDEVĪGI pirkt komplektā ➞ ietaupīsi −6,48 €